本试剂盒仅供科学研究用途,不可用于医学诊断。本文介绍了人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒的使用说明与检测原理。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附测试(ELISA)。首先,将样品加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,接着添加标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,使用底物TMB进行显色反应,在过氧化物酶催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下变为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关,通过在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度(OD值),即可计算样品浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:
- 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免操作过程中的细胞刺激。收集血液后,以3000转离心10分钟快速分离血清和红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后收集上清。
- 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水进行研磨,然后快速以3000转离心10分钟收集上清。
- 保存:如样本未及时检测,请分装为单次用量并置于-20℃冷冻,避免反复冻融。在室温下解冻时,请确保样品均匀充分解冻。
试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度分别为0、25、50、100、200及400pg/mL。在使用时,需将20×洗涤缓冲液按1:20稀释,即将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。洗板方法的具体步骤可参考相关操作手册。
结果判断可通过绘制标准曲线来实现。在Excel工作表中,以标准品的浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线并依据曲线方程计算各样本的浓度值。同时,务必注意操作过程中的事项,以确保检测的准确性。
免责声明:上述信息仅供参考,实际使用时请遵循相关操作规程和本试剂盒的具体说明。若您需要高品质的生物医疗试剂盒,欢迎访问俄罗斯专享会294,我们将为您提供优质的产品和服务。